طراحی، ساخت و بیان اپی‌توپ‌های پروتئین VP1 ویروس تب برفکی سروتیپO ایران
نویسندگان
چکیده مقاله:
Foot-and-mouth disease (FMD) is an extremely infectious and occasionally fatal viral disease with a rapid onset and a short course that affects cloven-hoofed animals and results in considerable financial losses. For this reason, availability of more reliable and efficient vaccines against Foot-and-mouth disease virus (FMDV) is felt as a necessity. The purpose of this study is to develop a perfectly safe immunogen in order to supplant the usual inactivated vaccine. A tandem repeat multiple-epitope recombinant vaccine against foot-and-mouth disease (FMD) virus (FMDV) type O was developed. In order to develop recombinant epitope vaccines against foot-and-mouth disease virus (FMDV), multiple-epitope recombinant vaccine (rP) comprising various combinations of B cell and T cell epitopes from VP1 capsid protein were synthesized. A 1155-bp gene fragment was amplified by PCR using specific primers. The amplicon was purified and then cloned into expression vector pET-32a. For expression of recombinant protein, pET32a-rP plasmid was transformed into Escherichia coli BL21 (DE3) cells. Recombinant protein was overexpressed with isopropythio-beta-D-galctoside (IPTG). SDSPAGE and DOT blotting were performed for protein determination and verification.The multiple-epitope recombinant was validated by colony-PCR and enzymatic digestion. IPTG with a dosage of 1.0 mmol/L could effectively promote protein expression. SDS-PAGE analysis demonstrated that our constructed prokaryotic expression system pET32a-rP efficiently produces a target recombinant protein with a molecular weight of about 60 kDa. Results showed that prokaryotic expression system is effective in producing the multiple-epitope recombinant immunogen for FDM virus and can be used as a potential method for poly epitope constructs.
منابع مشابه
ساخت وکتور حاوی فیوژن ژن vp1 ویروس بیماری تب برفکی و ژن hsp70 و بررسی بیان پروتئین آن
dna واکسن یک روش جدید ایجاد آنتی بادی ویژه – آنتی ژن و ایمنی بواسطه – سلول است. طرح اساسی dna واکسن یک ژن هدف- کاملا ساده کلون شده درون یک وکتور بیانی است. اتصال آنتی ژنها به hsp70 روش بالقوه ای برای افزایش تاثیر واکسن های dna می باشد. مکانیسم مولکولی آغازگر پاسخ های بالقوه ایمنی توسط hspها مبتنی بر این واقعیت است کهhspها ادجوانتهای طبیعی هستند و میتوانند سلولهای پردازشگر آنتی ژن را فعال کنند. ...
شناسایی دگرگونی ژنتیکی در ویروس تب برفکی تیپ A با استفاده از تعیین ردیف نوکلئوتیدی قسمتی از ژن VP1 ویروس
,1s1ya:.J'$n :7tb !9y.tu;1 9; q 5t'1& p I r lt 4!lr 9 61,; .l.iy c.!! ob lr+ : tt 4jr.'j .Al JLrob.;qrolr,J'fll t q ..rlaLr. 4 RT-PCR ri,Sle 1r o.ri 6bi!l Jt-t5 RIA :.pe, .pe1 *q&,.5b.'.;9; VPr Oijl ,r,iiqo-f .ddisl-t,r-a.ttJ nlceloltl Jlhr""gbyp,glrrsc*l . d,ri$ multiplexRT-PCR cycle sequencing cie) jlosu:pl t r PCR Jr-e .ri . 'r-JJl9; a{.Jt Fluorescent dye deoxy-terminator ar.bgy.5bai...
متن کاملطراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی
لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداریهای صنعتی مشاهده میشود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارتهای اقتصادی قابل توجه در گله میشود. کنترل عفونتهای ناشی از BLV با انجام آزمایشهای سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام میگردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید...
متن کاملبررسی فراساختاری پانکراس در موشهای آلوده به ویروس تب برفکی
بیماری تب برفکی FMD یک بیماری وزیکولار شدید و از نظر بالینی حاد، مختص حیوانات زوج سم شامل نشخوار کنندگان اهلی، خوک ها و بیش از 70گونه وحشی می باشد. عامل ایجاد کننده آن ویروس بیماری تب برفکی استکه مربوط به جنس آفتوویروس متعلق به خانواده پیکورنا ویریده می باشد.هفت تحت تیپ مجزا از ویروس تب برفکی با اثرات بالینی غیر قابل تفکیک مشخص گردیده است. این تحت تیپ ها شامل SAT1 SAT2 SAT3 O,A,C,Asia1 , می ب...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 8 شماره 15
صفحات 115- 123
تاریخ انتشار 2017-06
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023